基础免疫实验:聚乙二醇(PEG)沉淀实验检测CIC

  摘要:PEG是一种无电荷的直链大多糖,可非性地引起蛋白质沉淀.PEG使IC沉淀的机理可能在于使其自液相中空间而析出.

  聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一种无电荷的直链大多糖,可非性地引起蛋白质沉淀.沉淀具有可逆性,被沉淀的蛋白质生物活性亦不受影响.不同浓度的 PEG可沉淀量不同的蛋白质,在pH值、离子浓度等条件固定时,蛋白质量越大,用以沉淀的PEG浓度越小.由于PEG6000对蛋白质沉淀具有良好的选择性,所以在IC测定中主要采用PEG6000.

  PEG使IC沉淀的机理可能在于使其自液相中空间而析出,此外,PEG还可CIC解离,促进CIC进一步聚合成更大的凝聚物而被沉淀.在被检血清中加入低浓度PEG,可将血清中的IC沉淀下来,利用透光率比浊或散射比浊法可测出CIC的存在与含量.本法简便易行,国内已广泛应用.

  待测血清浊度值:(测定管吸光度—对吸光度)×100.以大于正浊度值的均值加2个标准差为CIC阳性.

  参考值:4.3±2.0,以大于或等于8.3为CIC阳性.或以不同浓度热聚合人IgG按以上方法操作制备标准曲线,根据待测血清吸光度值查标准曲线,即可得IC含量(相当于热聚合人IgG的ug/mL).

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