免疫检测分析:免疫共沉淀,染色质免疫沉淀在实验操作中所要注意的关键点的主要区别

  免疫共沉淀的目的是通过抗体和目的蛋白的相互作用从而捕获目的蛋白复合物,最终检测目的蛋白复合物中各成分之间的相互作用.所以实验中要注意的关键点和免疫沉淀相比,除了要注意抗体和目的蛋白相互作用的效果外,还要注意目的蛋白复合物的完整性.后者主要考虑因素是缓冲液中的去垢剂成分能否在有效目的蛋白复合物进入可溶相的情况下不目的蛋白复合物中各成分之间的相互作用.所以,免疫共沉淀实验中的关键因素除了抗体的选择外,裂解缓冲液配方中的去垢剂的成分和浓度对免疫共沉淀实验的成功与否至关重要,其选择相比免疫沉淀实验而言,要求更...

免疫检测分析:机体的天然免疫机制-正常血清的杀菌作用

  机体的天然免疫机构对消灭侵入的微生物具有重要的作用。如皮肤与黏膜是抵抗外来侵害的第一道屏障。皮肤具有机械的作用,黏膜可分泌许多液体,如泪液、唾液、胃液、肠液等,其中喊含有溶菌酶,可溶解和细菌。正好血清中也含有许多杀菌的因素,如补体。乙型溶菌素及备解素系统等,可革兰氏阴性或阳性细菌。血液中的白血球及巨噬细胞对外来异物有及消化的作用,这种作用也是天然防御中的重要机制之一。...

《自然—免疫学》:曹雪涛提出抗病毒天然免疫表观调控新机制

  干扰素在机体抗病毒天然免疫应答中发挥关键性的作用。在病毒感染过程中,干扰素产生的多少与持续时间受到精确调控,以确保机体清除入侵病毒的同时能避免病自身免疫损伤。目前关于干扰素表达精确调控的机制研究主要集中在天然免疫信号通蛋白,而以细胞核内RNA修饰的方式调控干扰素表达的机制尚不清楚。...

ELISA:ELISPOT (Enzyme-linked ImmunoSPOT)

  抗体的生物素化标记可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合.其后,生物素化的可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测.小的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础....

抗体抗原实验:抗体的生物素化标记Ⅱ

  抗体的生物素化标记可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合.其后,生物素化的可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测.小的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础....

Science:华人团队解决异种难题

  上世纪90年代,医学研究者们曾尝试解决这一问题。他们给出的策略是异种移植,即在人体内移植入动物器官。在这些动物中,猪的器官在尺寸与功能上和人体器官较为接近,因此也获得了研究人员的关注。然而,猪的基因组里含有内源性逆病毒(PERV)的序列,对人体有潜在的健康风险。直接将猪的入人体,可能会导致新型疾病的。几十年里,科学家们也一直在试图解决这个难题。...

免疫检测分析:免疫共沉淀实验方法

  (3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性....

免疫细胞检测技术:PCR-ELISA端粒酶检测法

  端粒是真核生物染色体末端的DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG).已确认端粒在基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用....

免疫检测分析:ELISA竞争法普遍存在的操作问题

  第二军医大学长海医院对此造成的影响进行了研究.将阴性标本94份并用生理盐水进行1:30稀释,在加入标本后按下表时间放置后再加入酶标抗体,然后检测结果如下:...

ELISA:ELISA方法的基本类型、用途及操作程序Ⅰ

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术.其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 )表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除.常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大抗原,后者用于测定抗体....

ELISA:大鼠TNF-B酶联免疫分析ELISA

  本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中TNF-B水平.用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入TNF-B、生物素化的抗TNF-B抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色.TMB在过氧化物酶的催化下成蓝色,并在酸的作用下成最终的.颜色的深浅和样品中的TNF-B呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度....

免疫荧光:组织切片制备及染色技术

(1)取材与固定:切取组织时应使用锋利的刀、剪,切取组织块时,从刀的根部开始向后拉动切开组织.组织块的厚度约为0.2~0.3cm,大小为1.5cm x 1.5cm x 0.3cm为宜.取好的组织块用10%福尔马林溶液固定24~48h....

抗体抗原实验:杂交瘤细胞的制备

4、在脾中部切开一小口,用注射器芯从一端轻轻压挤,再用无血清培养液冲洗,令细胞通过纱网,收集入平皿中,或用注射器向脾脏内注入3 ml无血清培养液,反复抽吸数次方法获取细胞,再制成细胞悬液亦可....

基础免疫实验:现代免疫学研究进展概况(90年代至今的研究进展)

人类基因组计划(human genome project, HGP),1985年由美国科学家提出,于1990年正式启动.我国于1994年在陈竺、杨焕明等著名学者的下启动了HGP, 参与测序区域占人类整个基因组的1%....

免疫细胞检测技术:免疫磁珠分选细胞的操作步骤和注意事项

  2.用20倍体积PBE洗细胞一次,再加PBE(0.3ml/1×108细胞)充分混悬细胞后,加入相应二抗包被的超微磁珠,混匀后置8~15℃孵育10~15分钟....