免疫检测分析：免疫组化DAB法 显示过氧化物酶
16. 除去,DAB显色10′(在显微镜下观察染色程度控制染色时间).蒸馏水冲洗....
抗体抗原实验：人用单克隆抗体质量控制技术指导原则
SP2/0或其他适宜的骨髓瘤细胞系.应为不合成或不分泌免疫球蛋白链型,具有符合骨髓瘤细胞的染色体特征,并有明确的来源历史及符合要求的保存条件....
基础免疫实验：间接凝集反应原理及分类
载体的存在使反应的性得以大大提高.间接凝集反应的优点为:①性强:间接凝集反应是最性的血清学反应方法之一,可以检测到微量的抗体和抗原;②快速:一般1h～2h即可判定结果,若在玻板上进行,则只需几分钟;③性强;④使用方便、简单....
抗体抗原实验：多克隆抗体的免疫电泳
免疫电泳又称为或免疫球蛋白电泳技术，这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM，IgG，IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中，首先利用蛋白质的量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离，然后将性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中，在抗原和抗体的扩散过程中，抗原和抗体适当比例的结合会导致沉淀的产生。0.85%盐不仅可以终止扩散过程也可用于洗去未结合的蛋白，抗原和抗体结合所形成的沉淀线即可以观察也可利用染色方法观察。...
免疫细胞检测技术：细胞凋亡的三种流式检测方法
细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间.利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞....
免疫检测分析：均相酶免疫测定
均相酶免疫测定是将半抗原或小抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性.测定时将待测样品、酶标记物、性抗体和底物溶液加在一起,待抗原—抗体和酶底物反应平衡后,即可直接测定结果,无需分离步骤,整个检测过程都在均匀的液相内进行.依据实验原理可分为竞争结和非竞争结两种类型....
免疫组化：基因敲除小鼠H-Pgds的表达检测
图A-D为免疫组化检测造血-前列腺素D合成酶在基因敲除小鼠肠粘膜中的表达,阴性对照不添加H- pgds抗体....
基础免疫实验：细胞受体结合免疫测定CIC法
细胞受体结合免疫测定法是根据CIC可与某些细胞表面的Fc受体或补体受体结合而建立的细胞技术,这类方法有灵敏度较高,性较强等优点,但需进行活细胞培养或细胞分离,影响因素多,重复性较差,目前仅适用于实验研究.此类技术有多种方法....
免疫细胞检测技术：淋巴细胞增殖功能的测定
T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝原受体,在性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖.植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体(SAC)、脂多糖(LPS,对小鼠有作用)则刺激B细胞发生增殖;美洲商陆(PWM)、肿瘤刺激剂PMA对T、B细胞的增殖均有刺激作用.最近发现,integrin家族中VLA组中某些受体与相应配体结合后也能活化T细胞.目前临床上最常选用 PHA刺激PBMC,根据形态学或氚...
免疫细胞检测技术：靶细胞杀伤实验：Cr51法
将分离的外周血T细胞, 培养7d后按照DC:T = 1:10的比例分别加入自身细胞致敏DC,细胞系致敏DC及未致敏DC, 继续培养3-4d后收集T细胞, 此即为效应细胞CTL....
免疫检测分析：胶体金免疫层析法对抗幽门螺杆菌相关蛋白A抗体的检测
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金在弱碱下带负电荷，可与蛋白质的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。...
基础免疫实验：免疫复合物的测定
由于抗原与抗体比例不同,所形成的IC大小各异,通常有三种形式:一是抗原抗体比例适当时,形成大的不溶性IC(大于19S),易被细胞捕获、和清除.二是抗原量过剩时,形成小的可溶性IC(小于6.6S),易透过肾小球滤孔随尿排出体外.三是抗原量稍过剩时,形成中等大小的可溶性IC(8.8-19S),它既不被细胞清除,又不能通过肾小球滤孔排出,可较长时间游离于血液和其他体液中,又称循环免疫复合物(circulatingimmunocomplex,CIC)....
免疫细胞检测技术：靶细胞杀伤实验：MTT和CCK8比较
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙的formazan.细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅.对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点.首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤.其次,W...
ELISA：酶联免疫吸附实验（ELISA）基本原理
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法.这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性.②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性.在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体...
抗体抗原实验：抗体的生物素化标记Ⅰ
8.将样品上1ml的筛柱,以PBS缓慢洗脱,收集1ml/管,蛋白质在1-3ml之间洗下;...