免疫细胞检测技术：细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要.在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比.目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、性稀释分析(limiting dilution analysis,LDA)和单细胞PCR,应用原位杂交技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及mRNA表达可以识别Th1和Th2细胞,此方法可获得较强的细胞内信号,但此方法工作量大、主观性强,难以进行大样本检测,且人识别能力有很大的局...
免疫检测分析：E 玫瑰花环形成试验的原理及方法
正外周血中T 细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团。这是因为人的T细胞膜上具有能和SRBC 膜上的糖蛋白相结合的受体，称为E 受体。已E 受体是人T 细胞所特有的表面标志，因此本试验可作为人外周血T 细胞的鉴定和计数，同时作为人细胞免疫功能状态的一个检测指标，也是分离T 细胞的常用方法之一。...
基础免疫实验：冷凝集实验知识及操作步骤
玻璃试管10支,分别加入生理盐水200微升,第一支加入待测血清200微升,混匀后取出200微升加入第二支试管,依次倍比稀释到第九支试管,取出200微升弃去;同时准备好2%“O”型红细胞500微升,操作离心后“O”型红细胞用生理盐水洗涤3次,取离心洗涤后的红细胞100微升加入4.9毫升的生理盐水中即可.最后加入200微升配好的红细胞到10支试管中,混合后放入4℃冰箱中3小时后判断凝集现象....
免疫细胞检测技术：靶细胞杀伤实验：CFSEPI法
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免疫检测分析：免疫电镜胶体金标记法
金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜.它是利用胶体金在碱性中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记.当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色.在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨.因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展,解决了一些过去未能解决的问题,80年代以来似有取代免疫电镜 PAP技术的趋势.胶体金标记抗体技术在电镜水平应用有许多优点:首先,手续不如PAP法烦琐,不...
基础免疫实验：如何设定抗体实验中各种样品选择的条件
请先确定您要检测的种属和使用的实验方法,然后查找相关产品,根据说明书上描述的“适用种属和实验方法”来确定合适的抗体.如果说明书中有明确您要检测的种属和实验方法均经过检测,则您可以放心地购买该产品....
免疫细胞检测技术：靶细胞杀伤实验：AnnexiV标记法
正常细胞的磷酯酰丝氨(phosphatidylserine,PS)位于细胞膜内表面,细胞凋亡时翻转露于膜外侧,可与annexinV高亲合力结合.研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件,先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的.将效应细胞与靶细胞充分共育后,用PE结合的效应细胞性单克隆抗体(如CD8-PE)标记效应细胞(不能与PE-mABA结合的细胞即为靶细胞),再用FITC-annexin V标记凋亡靶细胞,用流式细胞仪区分并定量此三类不同的细胞群,即可计算出效应细胞杀伤靶细胞百分数....
免疫疗法组合能够有效治疗小鼠癌症
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免疫检测分析；抗体产生细胞的检测——溶血空斑实验
1) 小鼠免疫4天后，颈椎脱位处死，取脾脏，去除脂肪组织，放平皿内，用冷Hanks液洗1—2次。...
免疫检测分析：荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种.很早以来就有一些学者试图将抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位ns等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功.这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique).荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种.与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广.国外生产的TDM用试剂盒,有相当一部分即属于此类,并且还有专供TD...
ELISA：ELISA中非性显色原因分析
【摘要】:影响ELISA中非性显色的原因很多,如试剂盒性、检验标本中含酶标记物的干扰物,操作过程中的问题.本文就这一原因作一简要分析,以便可以通过以上措施把非显色降至最低限度,从而提高检测的性,并得到更准确、可靠的实验结果....
抗体抗原实验：抗体的荧光标记法
许多蛋白质在其表面含有较多的赖氨酸残基.这些赖氨酸残基的游离ε-氨基可与FITC(其激发波长为492nm, 发射光波长为525nm)共价结合.与FITC结合的抗体可用为性的探针,以测定细胞相应抗原的存在.FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0 .85),而且形成的偶联物的稳定性很好.FITC是应用最广的荧光染料,流式细胞仪就按FITC的特性,设计了激光波长为488 nm,很接近于FITC的最大激发波长492nm)....
免疫细胞检测技术：恶性肿瘤病人外周血免疫指标的流式细胞仪检测及免疫治疗前后免疫功
恶性肿瘤的发生、发展与机体免疫系统密切相关.运用流式细胞术的方法,检测T淋巴细胞表面抗原(CD3、CD4、CD8),B淋巴细胞表面抗原(CD19、CD20),NK细胞表面抗原(CD16+56)在恶性肿瘤病人外周血中的表达,并检测活化T、B、NK淋巴细胞的免疫指标(CD3/HLA-DR、CD3/CD25)的变化,探讨淋巴细胞在肿瘤中的表达状况及其意义,并进一步分析恶性肿瘤病人免疫治疗前后的免疫功能改变,以致使我们更深一层认识肿瘤在细胞水平的免疫功能....
ELISA：ELISA方法的基本原理和操作步骤
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法.这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性.②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性.在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体...
微生物所等在免疫衰老研究领域取得系列进展
方敏课题组发现在用相同剂量的同种流感病毒分别感染年轻小鼠和老年小鼠后，老年小鼠表现出抵抗力更强的特征。研究发现，年轻小鼠在流感病毒感染后迅速产生强烈的免疫反应，快速清除病毒，但同时造成了严重的肺部病理损伤。而老年小鼠在流感病毒感染之后缓慢产生相对较弱的免疫反应，显着降低肺部病理损伤，病毒的清除虽然有些滞后但最终也可以实现完全清除。相关工作已被Aging and Disease 接收。...