ELISA：ELISA标准操作及技术服务的常见问题分析
大部分ELISA 检测均以血清为标本.血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非性显色.血清标本宜在新鲜时检测.如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应.一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深.超过一周测定的需-20℃保存.冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡.混浊或有沉淀的血清标本...
基础免疫实验：Masson染色
结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色....
免疫荧光：间接免疫荧光法测抗体
染色程序分为两步,第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体.第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体.如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体....
免疫检测分析：ELISA检测结果准确可靠的必要条件
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是ELISA检测结果准确可靠的必要条件.ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照操作,必能得出准确的结果....
免疫荧光：过碘酸雪夫氏染色（PAS染色）
过碘酸雪夫氏染色(periodic acid-schiff stain,PAS染色)：过碘酸是一种氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1.2乙二醇基使之变为二醛,醛与Schiff氏试剂结合,形成红色的取代...
抗体抗原实验：聚乙二醇(PEG)沉淀试验检测CIC
聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一种无电荷的直链大多糖,可非性地引起蛋白质沉淀.沉淀具有可逆性,被沉淀的蛋白质生物活性亦不受影响.不同浓度的PEG可沉淀量不同的蛋白质,在pH值、离子浓度等条件固定时,蛋白质量越大,用以沉淀的PEG浓度越小.由于PEG 6000对蛋白质沉淀具有良好的选择性,所以在IC测定中主要采用PEG 6000....
免疫荧光：藻酸盐包裹实验
4. 将第4次免疫后7天的小鼠用钠0.1ml (按100 mg/kg计) 腹腔注射麻醉,小鼠麻醉后置于解剖台上,切开背部皮肤,皮下植入4粒藻酸盐包裹颗粒,缝合皮肤,外敷手术胶膜;...
抗体抗原实验：抗血清的制备
作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。...
基础免疫实验：凝集吸收实验
1、1/10稀释伤寒杆菌免疫血清分别与肠炎杆菌与伤寒杆菌进行玻片凝集,可见伤寒免疫血清与两种菌均有凝集,说明二菌具有共同抗原结构,故发生交叉凝集反应....
抗体抗原实验：人VL基因文库的构建
8、用含甘油文库储存材料细菌接种到含100ug/ml氨苄青霉素和1%葡萄糖的100ml 2X TY培养基中,制备每种VL基因文库DNA.接种量应足够大以接种细菌数至少比文库容量大5倍.过夜培养后,按标准的DNA质粒制备方法进行操作.为了续后进行文库消化,可合并不同文库的DNA....
免疫组化：p53蛋白在肿瘤细胞中的表达
p53是一种肿瘤基因,由这种基因编码的蛋白质是一种因子,其控制着细胞周期的启动,许多有关细胞健康的信号向p53蛋白发送.P53基因具有阻滞细胞周期、促进细胞调亡、维持基因组稳定和肿瘤血管生成等调控作用.P53基因突变后,由于其空间构象发生改变,将失去了对细胞生长、凋亡和DNA修复的调控作用.在人类50%以上的肿瘤组织中均发现了P53基因的突变,这是肿瘤中最常见的遗传学改变,说明该基因的改变很可能是人类肿瘤产生的主要发病因素....
ELISA：ELISA方法的基本类型、用途及操作程序Ⅱ
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA):是酶免疫测定技术中应用最广的技术.其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 )表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除.常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大抗原,后者用于测定抗体....
Cancer Cell：重大进展！新型血液活检技术可通过读取血小板信息来快速检测肺癌
最近，来自荷兰的研究人员通过研究设计了一种进行液体活检的不同方法，相比寻找血液中癌细胞DNA或其它的而言，这种名为thromboSeq的新型检测手段能够通过检测被血液中循环血...
免疫荧光：免疫荧光染色技术
固定后以冷的0.01Mol/L pH7.4PBS液浸泡冲洗,最后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光....
免疫组化：Calcitonin和IGFBP1和转染Emx2小鼠子宫内膜中的表达
调控目标Emx2基因是是一种同源盒基因,与基因的表达与调控有关.如Emx2的表达可以影响成体哺乳动物室周区的神经干细胞分化成神经元和胶质细胞;而Emx2的表达停止时,神经干细胞对称分化为这两个干细胞的频率增加....