免疫荧光:直接免疫荧光法测抗原

  将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应.其优点是方法简便、性高,非性荧光染色少.缺点是性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体.此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查....

基础免疫实验:血清补体总活性测定

(1)绵羊红细胞(sheepredbloodcell,SRBC) 自绵羊颈静脉采血,注入装有等量或二倍量阿氏(Alsever)液的无菌三角烧瓶中,轻摇3-5min,分装,4℃保存,可用2-3周左右.试验时,取一定量的SRBC用生理盐水洗涤3次,最后1次洗涤离心的条件每次试验要保持一致.试验时一般配成1×109SRBC/ml.为使每次试验时SRBC的浓度标准化,可根据经细胞计数器校准的浓度为1×109SRBC/ml的细胞悬液,用分光光度计测定其OD541nm值,以后每次试验均参照此OD值校正 SRBC浓度;...

免疫荧光:脊神经节双重染色

  脊神经节是脊髓两侧的脊神经背根上的膨大组织,属感觉神经节,内含许多假单极神经元胞体和平行排列的神经纤维束.神经元胞体(节细胞)呈圆形或卵圆形,大小不等,大的染色浅,小的染色深.胞核圆形,位于胞体中央,核仁明显.节细胞周围可见一层扁平或立方形的卫星细胞,其核圆或卵圆形,染色较浅,胞质不明显....

抗体抗原实验:抗红细胞抗体(溶血素)的制备

  抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的性抗体。这种含有性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义,而且对,肿瘤以及某些科研工作也有重要意义。...

免疫检测分析:甲型肝炎病毒HAVAb-IgM检测

甲型肝炎病毒(HAV)属于微小核糖核酸病毒,归类为picorno病毒科肠道病毒属第?2型.HAV含有单股线性RNA基因组,长度约为8 100bp,沉降系数为33—35s.HAV的增殖部位主要在肝细胞的胞浆内,并通过胆汁从粪便排出体外.目前,甲型肝炎病毒的临床常规检测项目主要是检查血清中HAVAb-IgM和HAVAb-IgG....

免疫组化:免疫组化检测大鼠结肠hK6蛋白的表达

  组织型激肽酶基因家族Kallikrein(klk)编码一组具有丝氨酸蛋白酶活性的组织型激肽酶(hK).klk6是klk之一,其编码蛋白被命名为hK6.研究表明,hK6广泛存在人体组织和体液中,而组化法发现hK6在卵巢癌组织中表达增高,可作为卵巢癌的一个诊断指标....

抗体抗原实验:单克隆抗体生产技术

  单克隆抗体的生产既可采用动物体作为生物反应器进行生产,又可采用人工生物反应器培养杂交瘤细胞进行生产,前者可通过诱发实体瘤及腹水瘤,从腹水中提取,也可采用牛淋巴液体外循环,从培养上清中提取McAb,后者在体外大量培养杂交瘤细胞,常采用旋转培养法,中空纤维培养法,悬浮搅拌培养法等....

ELISA:快速ELISA检测动物组织或材料中的盐酸克伦特罗残留

  克伦特罗(Clenbuterol)属于beta兴奋剂,是一种高选择性的兴奋剂和激素,具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用.进年来被一些人非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物的生长.当用作生长调节剂时,其添加量是治疗量的5—10倍,常在动物体内残留而给消费者带来危害....

免疫细胞检测技术:用于免疫印迹的细胞裂解液的制备

  大多数蛋白质溶液可与样品缓冲液混合并直接用于免疫印迹.下述方法可用于细胞去污剂裂解液,柱层析洗脱液和大多数其他来源的抗原样品....

免疫组化:免疫组化检测心肌梗死大鼠模型的各项指标

a -smooth muscle actin 是一种具有收缩能力的微丝蛋白,a-SMA广泛分布于几乎所有的肌型细胞中.目前α-SMA抗体被广泛用于纤维化组织的病理学研究中....

免疫检测分析:免疫双扩散检测抗GFP血清抗体

1. 1.5%琼脂的配制:pH 7.4的PBS 100mL中加1.5克琼脂,微波炉中小功率加热,使琼脂完全溶化。...

免疫组化:免疫组化检测NiV性抗原

  很多组织都可以用来进行免疫组化来检测NiV的抗原.用纯化的NiV免疫兔而制备的兔抗血清和一些单克隆抗体进行免疫组化检测NiV性抗原.酶标第二抗体选用碱性磷酸酶标记的抗兔或者抗鼠的抗体....

免疫细胞检测技术:血液中微粒的流式检测及临床意义

  各种血液细胞及血管内皮细胞受到刺激而活化或发生凋亡后,细胞膜磷脂酰丝氨酸由胞膜内层进入外层,以出芽方式形成小泡状结构而脱落,形成所谓的“微粒(microparticle,MP)”.正体血液中即存在少量MP,而在许多疾病中MP水平明显升高.MP具有促进血液凝固反应发生与血栓形成等多种重要生物学活性.越来越多的研究提示,检测血液MP水平与性质有助于监测病情、指导治疗与疗效判断....

免疫检测分析:抗体储存的温度和时间

  抗体具有严密的三维结构,已进化成为在大多数生物中,甚至机体大面积创伤时也能保持其活性.抗体紧凑的三维结构使抗体能抵御轻度变性的,从而也使抗体的长期存放较为容易.通常需要将甘油或其他稳定剂加到储存的缓冲剂中,以保持实验室中纯化的蛋白活性....

免疫检测分析:ELISA法测定单克隆抗体的效价

ELISA 是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种性很高的试验技术.免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原上,形成酶标抗体/酶标抗原,称为酶结合物.该酶结合物的酶在免疫反应后,作用于底物使之呈色,根据颜色的有无和深浅,定位或定量抗原/抗体.ELISA 法是免疫酶技术的一种,其特点是利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原/抗体,使之固相化,免疫反应和酶促反应都在其中进行.在每次反应后都要反复洗涤,这既了反应的定量关系,也避免了末反应的游离抗体/抗原的分离步骤.在ELIS...