免疫检测分析:兔红细胞玫瑰花环试验

  本实验介绍了兔红细胞玫瑰花环试验操作流程。玫瑰花环试验,又称为花结试验。是测定淋巴细胞数量和功能的一种方法。...

免疫荧光:免疫荧光常见问题总结

  (3)我的阳性对照采用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是rabitt和rat的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物....

抗体抗原实验:如何选择实验抗体(一抗的选择原理及方法)

  检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,在同一个抗体公司,可能会有好几种,甚至好几十种;在不同的抗体公司,那就更多了.那怎样在琳琅满目的抗体中,选择自己实验需要的抗体呢?...

ELISA:影响ELISA结果的常见因素及控制方法Ⅰ

在临床实验室,对试剂的准备一般不太注意,通常的做法是在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性.因此,在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20~30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求....

免疫荧光:免疫胶体金标记技术简介

  胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术.由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确.因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术.现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域....

免疫组化:免疫组化技术之酶法

免疫酶法是借助酶细胞化学等手段显示组织抗原(或抗体)的新技术,是在免疫荧光法的基础上发展起来的.免疫酶法的基本原理与免疫荧光法有所相似,免疫酶法是将酶以共价键的形式结合在抗体上,制成酶标抗体,再借助酶对底物的催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于光镜或电镜下进行细胞表面或细胞内部各种抗原成分的定位.已如前述,免疫荧光法具有操作简便、灵敏、性高、省时的优势,但同时也具有令人遗憾的不足,特别是荧光标 本不能长期保存以及需要价格昂贵的荧光显微镜才能观察的问题.为此,Nakane等人(1966...

免疫检测分析:生物素-亲和素系统(BAS)—ELISA技术

  20世纪70年代后期在免疫酶技术中利用生物素-亲和素系统(biotin-avidinsystem,BAS)标记抗体发展了又一种新型生物反应放大技术,即BAS-ELISA技术,它使用生物素-亲和素-过氧化物酶复合物作为剂,组成一新的生物放大系统进一步提高检测的度.生物素(biotin)是广泛分布于动植物体内的一种生长因子,又称辅酶R或维生素H.亲和素(avidin)是卵白及某些微生物中的一种蛋白质,由4个亚单位组成.二者有高度亲和力,且均能偶联抗体、抗原和辣根过氧化物酶而不影响其生物学活性....

免疫荧光:免疫荧光组织(细胞)化学技术

① 异硫氰酸荧光素(fluorecein isothiocyante,FITC),为、橙或褐结晶粉末,有两种异构体,易溶于水和酒精等溶剂.量为389,最大吸收光谱为490~495,最大发射光谱为520~530urn,呈现明亮的黄绿色荧光,是最常用的标记抗体的荧光素....

基础免疫实验:疫苗的分类

  细菌或病毒灭活疫苗是细菌、病毒或立克次氏体的培养物,经化学或物理方法灭活制成,便之完全对原来靶器官的致病力,而仍保存相应抗原的免疫原性,如甲肝疫苗等.类毒素是由细菌在液体培养条件下,产生外毒素,经脱毒提纯工艺制成....

抗体抗原实验:抗补体试验检测与补体结合的CIC

  血清中有免疫复合物存在时,可与其本身的C1(内源性C1)结合.将被检血清56℃加热1h,能结合的C1,空出补体结合位点.当加入豚鼠血清(外源性C1)及系统(致敏SRBC)时,CIC又可与外源性C1结合,使致敏SRBC的溶血被....

免疫荧光:免疫荧光组织(细胞)化学技术Ⅱ

  免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量,以达到对抗原物质定位、定性、半定量测定的目的....

免疫检测分析:应用足跖增厚法对迟发型反应(DTH)的检测

免疫后4天,测量左后足跖部厚度,然后在测量部位皮下注射20%(v/v)SRBC,每只鼠20μL(约1×108个 SRBC),注射后于24h测量左后足跖部厚度,同一部位测量三次,取平均值。...

免疫检测分析:放射免疫分析法的建立

  标记抗原应具备:①比放射性高,以方法的灵敏度;②免疫活性好;③所用的核素的半衰期尽可能长,标记一次可较长时间使用,这对来之不易的抗原尤其重要;④标记简便、易防护....

免疫检测分析:免疫胶体金标记抗体及检测抗原

3.确定蛋白质包被的最佳浓度:将蛋白质作连续10倍稀释各1ml,加入5ml胶体金溶液,1分钟后加入1ml 10%氯化钠溶液,静止5分钟;以胶体金溶液为空白对照测定光吸收度,选择最低吸收值的蛋白质浓度用于正式包被....

免疫检测分析:电化学发光免疫测定原理

[/strong] 电化学发光免疫测定(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLI).ECLI 是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术.电化学发光法源于电化和化学发光法,而ECLI 是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物,是一种在电极表面由电化学引发的性化学发光反应,包括了电化学和化学发光二个过程.ECL 不仅可以应用于所有的免疫测定,而且还可用于DNA/RNA探针检测....