学习使用大肠杆菌感受态细胞导入外源DNA，使学生掌握DNA进入细胞的原理和实验操作技术; 掌握PCR法快速鉴定重组载体的基本操作。
是指将质粒DNA或构建的重组子导入细胞的过程。细菌细胞在低温，低渗（CaCl2溶液）中膨胀成球形。混合物中的DNA形成了抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面。经42℃短时间热激处理后，促进了细胞吸收DNA复合物。重组质粒宿主细胞后，还需要对菌落进行筛选鉴定，通过α互补进行筛选是最常用的鉴定方法之一。
目前实验使用的许多载体都具有一段大肠杆菌β-半乳糖苷酶的启动子及其编码α肽链的DNA序列，此结构称为lacZ基因。lacZ 基因编码的α肽链与失去正常氨基末端的β半乳糖苷酶突变体互补，产生具有功能活性的β半乳糖苷酶，这种现象称为α互补。在IPTG（异丙基硫代β-D-半乳糖苷）的下，β半乳糖苷酶能将X-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）切割成半乳糖和蓝色的底物5-溴-4-靛蓝。因此，任何携带lacZ基因的质粒载体到β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后，都会在涂有IPTG和X-Gal的培养基平板上形成蓝色菌落。当有外源DNA片段插入到位于lacZ中的多克隆位点后，就了α肽链的阅读框，从而无法形成α互补，不能产生具有功能活性的β-半乳糖苷酶，因此含有外源DNA片段的重组子的克隆在涂有IPTG和X-Gal的培养基平板上是白色菌落。
PCR法快速鉴定重组载体的基本原理是直接用菌液为摸板，通过引物的扩增来鉴定外源片段是否重组。
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