20 世纪 60 年代中期,在 Nygaarad 和 Hall 证明单链能转移到硝酸纤维素膜上后, Denhardt 以及 Gillespie 和 Spiegelman 用这种方法固定的核酸能非常灵敏地与放射性标记的探针杂交.这种方法很快成为生物学中的一个主要方法,并在整整 10 年之内毫无.
到了 20 世纪 70 年代中期,有两个不同的国家对该技术进行了较大的改进.苏格兰的 Ed Southern 杂交能被用来检测复杂 DNA 片段群体中的序列.在该方法中,先用琼脂糖凝胶电泳分离酶消化的 DNA 片段,然后转移到笑傲算纤维素膜上用探针杂交.同年, Grunstein 和 Hogness 在加利福尼亚次啊用这种方法筛选出含有目的质粒的大批量的菌落,该质粒带有外源 DNA 片段.正如 Denhardt 的解释,生长在硝酸纤维素膜表面的菌落被原位裂解,出来的单链 DNA 被固定在膜上并与放射性标记的核酸探针杂交.由 Grunstein 和 Hogness 首创的实验方案是相当经得住的,多年来只有微小的改变.它一直是用来鉴定携带目标 DNA 序列质粒或黏粒单菌落的最常用技术.
将菌落从培养皿转移至滤膜,、变性和固定细菌和质粒 DNA ,用放射性标记的探针杂交已固定的 DNA 并使培养皿中探针杂交的菌落.这些技术所使用的探针平均长度在 100 个核苷酸以上.用较短的放射性标记探针筛选菌落的方法.探针无论长短,此处及第十章介绍的技术可以他那个是筛选成千上万个菌落,并鉴定带有重组质粒的克隆.可以对小量制备的质粒 DNA 进行酶分析和Southern 杂交,从而鉴定这些质粒的机构.
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