1、获取脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1～2次后,置于30～50倍的Hanks液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液,
2、为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5～10分钟后,细胞或细胞团块自然下沉,脂肪等杂物易漂浮于悬液表层,吸除上清,如此反复二三次可获得较多的细胞成分,
3、向末次沉淀物中加入适量营养液,通过纱网或纱布滤过,计数细胞并调整好细胞密度,接种入培养瓶或皿中,置5%CO2温箱中培养,
4、细胞生长汇合后,可用0.25%胰蛋白酶消化法做传代处理,加消化液的量以能覆盖细胞层即可,待细胞开始从瓶壁脱离(平均5～10分钟),加入含有血清培养液,吹打制成细胞悬液,
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