(2)分组将动物随机分为正常组和模型组,两组每组又分3h、6h、12h、24h及3d、7d、15d、30d等8个时点组别.
(3)立体定向手术模型建立 10%水和氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠后,将大鼠置于立体定向仪上固定,剪毛消毒,在头部背侧中部做纵想切口,依次切开皮肤、皮下组织,纯性分离骨筋膜,按大鼠脑立体定位图谱,选择右侧海马腹后部CA3区,坐标定位于前囟后3.4mm,右侧旁开5.0mm,垂直深度7.0mm;在坐标点周围以小型牙钻钻开颅骨,校准微量进样器垂直度后,抽去海人酸1.0μl ,缓慢注射,于10~15min内注射完毕,留针5min后拔出,皮肤切开处给予少量青霉素粉剂,全层缝合头皮,常规饲养.
(1)行为学观察 参照Racine分级标准(见大鼠青霉素癫痫模型).模型组在海人酸给药后1~3h ,大鼠可出现凝视、湿狗样抖动,阵发性头面部肌肉抽搐、节律性点头,上述症状发作逐渐频繁,发作时间逐渐延长,发作间歇期逐渐缩短.大鼠可出现发作性剧烈狂奔、跳跃、跌倒、翻滚,并出现全面强直一阵挛发作,出现癫痫持续状态.持续1~3h后,发作逐渐稀疏,至海人酸给药后6~8h ,偶尔出现点头.头面部肌肉抽搐、前肢阵挛.海人酸给药后8~10h ,绝大多数大鼠活动逐渐恢复,无明显癫痫行为.24h~30d内,大鼠出现慢性、反复性发作,每周1~3次,发作持续时间较急性期短,级别也较低(2~3级).
(2)脑组织病理学检查 光镜观测,模型组注射侧海马神经元细胞排列不整齐,细胞间隙增大,出现肿胀﹑变性﹑坏死﹑崩解﹑胞体固缩﹑体积变小﹑胞浆浓缩深染,细胞核固缩,核仁不清,死亡细胞核裂解,细胞浆流失,以CA3区和门区为主,至7d时CA3区和门区神经元几乎完全缺失,失去带状排列规则,出现大量格子细胞﹑新生毛细血管,胶质细胞增生显著.对侧海马损害较注射明显减轻,神经元变性以CA1区和门区为主.双侧齿状回损害较轻.
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