实验技能SOP:血清尿素的测定标准操作规程(SOP)

  【原理】血清尿素(Urea)是蛋白质的正常代谢产物.它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一.肾性血清尿素含量增加,提示肾小球损伤.是研究药物肾毒性的重要指标之一.

  【方法】取家兔2只,1只注射氯化高汞5ml/kg(0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg),另1只注射等量的生理盐水.48小时后,从家兔耳静脉取血1ml,制取血清,按血清尿素测定方法测定血清尿素含量.

  【原理】尿素与二乙酰在酸性反应中加热,缩合生成色素原二嗪化合物.因二乙酰不稳定,不宜直接加入,可由化学反应生成.通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用,产生乙二酰.二乙酰和尿素反应,缩合生成红色的二嗪.根据颜色深浅确定尿素含量的多少.

  (1)酸性试剂:在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml,然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml.冷至室温,加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g.溶解后用蒸馏水稀释至1L,置棕色瓶中冰箱保存,可稳定6个月.

  (2)二乙酰-肟溶液:称取二乙酰-肟20g,加蒸馏水约900ml,溶解后,再用蒸馏水稀释至1L,置棕色瓶中,贮放冰箱内可保存半年.

  混匀后,置沸水中加热12分钟,置冷水中冷却5分钟后,用分光光度计在波长540nm,以空白管调至零点.比色读取标准管及测定管的吸光度.

  1.本法线 mmol/L 尿素,如遇高于此浓度的标本必须用生理盐水作适当的稀释后重测,然后乘以稀释倍数报告之.

  2.试剂中加入硫氨脲和镉离子,增进显色强度和色泽稳定性,但仍有轻度退色现象(每小时小于5%).加热显色冷却后应及时比色.

  5.血清尿素增高的病理因素常见于肾脏原因,肾脏原因又可分为肾性、肾前或肾后:①肾性:急性肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎都可见血液中尿素含量增高.②肾前或肾后:引起尿量显著减少或尿闭,如脱水、水肿、腹水、循环功能衰竭、尿结石或前列腺肿大引起的尿梗阻等均可引起血清尿素含量升高.此外,生理因素也可导致血清尿素增高.如体内蛋白质分解过多:急性传染病、上消化道出血、大面积烧伤、大手术后和甲状腺功能抗进等.虽然血清尿素增高,此时其它肾功能试验结果一般均正常.

手机正文底部

您可以还会对下面的文章感兴趣:

  • 实验技能SOP:大鼠新生鼠灌注取脑及后固定规则(SOP)
  • 实验动物基本操作:受冻仔兔急救方法
  • 实验动物基础:小鼠在生物学研究中的应用
  • 实验动物基本操作:实验动物采血完全指南
  • 饲养:仔兔不同生长时期的饲养管理技术
  • 最新评论