目的：本操作规程是关于利用小鼠明暗穿箱实验对受试物的抗焦虑活性进行药理学评价的具体操作规程.
仪器：分析天平,摄像仪,机,器,小鼠明暗箱(为一个敞开的箱子(45cm×27cm×27cm),内部分为明箱和暗箱,明箱占箱子的 3/5,暗箱占2/5,有一个高出箱壁20cm的隔板分开,隔板的底部开一个7.5cm×7.5cm的方口.明箱内涂成白色,由一个60W的白纸灯泡照明,灯泡高出箱子17cm.暗箱内涂成黑色,上方17cm置一个不通电的红色灯泡.箱子底部划上边长9cm的方格.).
使用昆明种小鼠,雄性,体重范围在18~22g之间.饲养于12h一个循环的反向明暗转换的中(7am关灯)10d.实验开始前5-7d每天抚摸 动物1-2min,减少无关刺激对实验的影响.对一般体征进行观察,选用健康状况良好的动物供实验使用.
实验当日给药前将受试物及阳性对照物用溶媒充分溶解或混悬,根据给药剂量及给药容积配制成所需浓度的均匀的溶液或混悬液.
2 给药 经口给药,给药容积为0.1-0.2ml/10g,各组实验动物的测试呈正反交替顺序进行,记录给药时间.3 致焦虑 给药适当时间后,将小鼠置于明箱中央,背朝隔板.实验于10am至2pm安静下进行,暗箱红灯不通电,明箱白炽灯照明.每只小鼠测试后迷用湿海绵彻底清洗并擦干.
4 记录实验过程 通过明暗箱上方的摄像机及与隔壁房间相连的器和机观察和记录5min内小鼠的活动情况.
5 数据读取 由不知情的熟练实验人员观看实验带,分别记录小鼠穿箱次数、在明箱停留的时间及总穿格次数.
在对照组和给药组之间以穿箱次数、明箱停留的时间及总穿格次数分别进行Student’s t检验,判断给药后有无显著性差异.
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