实验动物解剖:哺乳类实验动物病理剖检方法

  一般用于组织学取材的实验动物剖杀前应先隔离检疫7~10d,用于实验组和对照组动物的病理剖不同动物实验的要求而定.剖检前的体表检查项目如下:

  丰满还是消瘦,检查时可用手抚摸实验动物背、腰部,营养良好时,背腰部厚实,皮肤弹性好.营养不良时,背腰部椎骨突出,肋骨明显.

  眼睛的瞳孔是否清晰等,有无分泌物,眼睑有无发炎及红肿,球结膜颜色变化,有否潮红、苍白、黄染或发绀.

  呼吸动物如呼吸次数、节律、有无呼吸困难;上呼吸道检查如鼻腔分泌物多少、有无喷嚏和咳嗽;必要时可通过听诊检查肺部.

  采食与饮水观察,包括食欲废绝、减退、亢进和异嗜,口腔黏膜颜色和气味.有无、腹泻、便秘,肛周有无污物,粪便数量、硬度、颜色、气味等.

  (6)体积大和分叶的器官,应视不同组织选取多个部位,小器官可整体取材并固定,如淋巴结、扁桃体、甲状腺等.

  (8)所取材料应尽量保持标本的完整性,不宜过厚或过薄,一般厚约3~5mm,大小为1.5~2cm2.

  (12)同一实验中的对照组和实验组动物应交叉剖检,严格统一各种条件和操作,尽量避免各种可能的干扰因素.二、病理剖检基本操作

  在同一平面上时,先绷紧组织,将刀刃与平面垂直,用力要得当,一次垂直切开,切口整齐而不偏斜,斜切和锯切,以减少损伤.切开多层组织时,一般应按组织层次分层切开,避免损伤深层组织器官.

  可用锐性分离法,使用刀、剪等锐性器械直接切割,如皮肤、黏膜、精细结构和紧密连结组织的分离;也可用钝性分离法,使用分柄、止血钳、剥离器,手指等分离,如肌肉,疏松结缔组织等的分离.

  大量出血导致胸、腹部积血使剖野模糊不清,可能会影响和干扰病变的辨别和取材,因此动物剖检有时要求止血.

  (1)纱布块止血法.剖检过程中,为观察病变性质和部位,辨清组织和神经、血管通,以及对较广泛的毛细血管渗出,可用纱布按压施行短暂性的止血,但不可用纱布来回擦拭血液,以免损伤组织.

  (2)钳夹止血法.先用纱布块止血,看清出血点或血管后用止血钳的尖端垂直对准出血点,迅速而准确的钳夹并捻转,使血管闭塞而止血.

  沿腹部正中线切开剑突至之间的腹前壁,再沿最低位肋骨分别向左右两侧切开侧腹壁至脊柱两旁,完全腹腔器官.观察有无积液、血液和炎性渗出 物,如有则用吸管吸出,测量容积并经离心沉淀涂片检查,必要时作细菌培养.检查粘膜是否光滑,有无充血、瘀血、出血、破裂、脓肿、粘连、肿瘤、寄生虫等, 膈的紧张度及有无破裂.

  (1)脾脏.检查大小、厚薄、硬度、性状、色泽、有否肥厚、破裂等.然后沿长轴将脾切成两半,切面要平整,检查脾小梁、红髓、滤泡的色泽,切面的出血量.

  (3)胃肠.检查胃的大小、胃肠道浆膜面的色泽,有无粘连、肿瘤、寄生虫结节.然后沿胃大弯、肠系膜附着部依次剪开胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直 肠.观察胃内有无异物,内容物的气味及性状,除去内容物,检查黏膜颜色,有无充血、出血、化脓.采用边剪开边观察的办法检查肠管,观察肠内容物数量、性 状,有无气体、血液、异物、寄生虫,肠黏膜皱壁有无增厚、水肿、充血、粘液量、溃疡、坏死、淋巴组织性状及有无炎症.

  (4)肾脏.首先检查肾脏大小、硬度、被膜是否容易剥离,肾表面的色泽、平滑度,有无疤痕、出血变化.然后检查切面皮质和髓质的色泽,有无瘀血、出血、化脓和梗死.注意观察皮质和髓质交界处的切面是否隆突,以及肾盂、输尿管、肾淋巴结的性状,有无肿瘤及寄生虫等.

  (5)肝脏.首先检查肝脏的大小、被膜的性状、边缘的厚薄、实质的硬度和色泽,以及肝淋巴结、血管、肝管等的性状.然后作切面,检查切面的出血量、色泽,肝小叶性状、有无脓肿、肝坏死等变化.

  (3)雌性生殖器官.沿子宫体背侧剪开子宫角,检查子宫内膜的色泽、有无充血、出血、炎症等,观察卵巢和输卵管有无粘连、出血、水肿、积液等.

  用镊子夹住胸骨剑突,剪断膈肌与胸骨的连结,提起胸骨,在胸椎两侧分别剪断左、右侧胸壁的肋骨,取下整个胸壁,打开胸腔,依次取出胸腺和心脏.将下 颌骨的两下颌支内侧与舌连结的肌肉切断,将咽、喉、气管、食道与周围组织分离,用镊子夹住气管向上提起,剪断肺与胸膜的连结韧带,然后将咽、喉、气管、食 道连同整个肺脏一并取出.如有积液应观察其数量和性状,尽量吸取,测量容积并涂片,检查胸膜色泽,有无出血、充血或粘连.

  (1)心脏.剪开心包膜,心脏,注意心包的光泽度及心包内液体的情况,心脏的大小、外形、心外膜情况.自下腔静脉入口处至右心房作直线剖开, 从此直线中点沿心脏右缘剖至心尖部,从距离心尖部与心室间隔右侧1cm处平行地剖至肺动脉;检查右心房、右心室、三尖瓣、肺动脉瓣、腱索有否病变.自左右 静脉入口处将左心房直线切开,沿心脏左缘剖至心尖部,再从距离心尖部与心室间隔左侧1cm处平行地剖开左心室的前壁和主动脉,检查二尖瓣、主动脉瓣、腱索 有无病变,左心房、左心室内壁有无出血和感染.自冠状动脉口起剪开前降支和旋支,在主动脉根部右侧,于右心室的心外膜找到右冠状动脉主干,先横切一刀,再 剪至后降支;观察有无粥样硬化和血栓等.

  (2)口腔.检查牙齿的变化,口腔黏膜的色泽、有无外伤、溃疡和白斑,舌黏膜有无出血、外伤及舌苔的情况.

  以猴为例,剥离颅顶部软组织,沿眉弓至枕外隆凸上0.5cm处的连线,用弓形锯环绕该线锯开颅骨外板及板障,然后用丁字凿轻轻凿开内板,揭开颅盖, 此时可见覆盖于脑表面的硬脑膜,切开硬脑膜脑组织,在距颅骨锯口断端上0.5cm处,从前向后环行剪开硬脑膜,枕部的硬脑膜应保留1.5cm长,防止 取脑过程向后推压脑组织时,枕骨断端损坏枕叶脑组织.向后方轻轻揭起硬脑膜及大脑镰,脑组织,用手指从额骨前上方伸入颅前窝,轻轻推压大脑额叶,直至 见到筛板上的嗅球为止,切断嗅丝与嗅球的联系,将嗅球与脑一齐拉起,见到视神经和视交叉时立刻停止,在脑底附近依次切断颈内动脉、视神经,再将脑向后拉, 可见到垂体及漏斗,继续将脑向后拉起,切断连于脑的脑神经.从脑干腹侧面把手术刀伸入枕骨大孔,切断脊髓,即可将脑取出,用流水冲洗干净备用.新鲜脑很 软,易变形和受挫伤,操作过程中必须用手扶托,取出脑后应立刻用纱布包裹,浸泡固定液中保存,以免变形.

  检查软脑膜、硬脑膜血管充盈情况,脑回之间的脑沟中液体的数量与色泽,脑表面凸起或凹下的地方是否明显,可用手触膜判定其硬度.用刀将脑做一水平切面,保留胼体,侧脑室,注意检查尾状核有无出血、软化灶.侧脑室内容物数量、性质,然后将脑做多处切面,检查有无变化.

  (2)脏器称重前应尽量将周围脂肪组织和结缔组织剔除,并用滤纸吸去脏器表面血液及体液,特别是肾上腺、甲状腺、前列腺等较小的器官,更要新鲜称重,防止器官干燥失水而重量减轻.

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