①供试家兔应健康无伤、正常、毛色光滑,体重1.7～3.0kg,雌雄皆可,雌者无孕,分笼饲养,预测体温前一周应用同一饮料,在此期间,体重应不减轻,、食欲、排泄不得有异常现象;
②检查供试品前3～7日应以下列试验用兔预测体温,进行挑选：新兔;上次试验升温达0.6℃休息两周以上的试验兔,三周未曾使用的试验兔.挑选试验的条件与检查供试品相同,仅不注射药液,测体温时,体温计插入的深度各兔应相等,约6cm,每1小时测理体温1次,,共测4次,体温均在 38.0～39.6℃范围内,且最高最低体温的差数不超过0.4℃为符合,方可供试验用.每只家兔用于热原试验体温的次数不超过10次;
①用具的洗涤与灭菌 a 洗涤：注射器、称量瓶用水冲洗后放入清洁液中浸泡,取出用水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗至少3次,注射针、称量勺、镊子用水冲冼后,在2%NaNCO 溶液中煮沸10-15分钟,再用不冲洗干净后用蒸馏水冲洗至少3次;b灭菌：将洗干净的注射器、注射针、称量瓶、镊子置于铝盒中,放于250℃加热30分钟,放冷密闭保存备用;
②供试品溶液的制备：a精密称取青霉素钠(钾)适量,加灭菌无热原注射用水溶解成每1ml含24mg的溶液;c制备好的供试液放入恒温水浴箱中38℃预热待检;
③间隔30～60分钟后,第二次测温,同一只家兔两次预测体温之差不得超过0.2℃方可作试验用,以再次体温的平均值作为该兔的正常体温.当日使用的家兔体温应在38～39.6℃的范围内;
⑤预测体温后15分钟内自兔耳静脉缓缓注入已制备的供试液,注射前用75%的酒精擦兔耳边缘,注射剂量为青霉素钠(钾)注射用每公斤体重0.5ml,氨苄西林钠、注射用氨苄西林钠每公斤体重1ml,注射后用手捏住针眼处,以助止血,每批供试品可用同一支注射器;
⑥注射完结后,每隔1小时测量体温1次,共测3次,取3次中最后体温减去平均体温,即为该兔体温的升高度数;
①在初试3只家兔中,升温均在0.6℃以下,且3只升温总数在1.4℃以下,或在复试5 只兔中升温0.6℃或0.6℃以上的兔数不超过1只,且初复试合并的8只兔的升温总数不超过3.5℃时为符合热原检查;
②初试3只兔中,若有1只兔升温0.6℃或0.6℃以上或3只兔升温均低于0.6℃但升温总数达1.4℃或1.4℃以上时应另取5只兔复试;
③初试3只兔升温0.6℃或0.6℃以上兔数超过1只或在复试5只升温0.6℃或0.6℃以上兔数超过1只,或在初、复试中合并8兔升温总数超过3.5℃时为不符合热原检查;
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