耐药性癫痫约占癫痫患者的30%,耐药癫痫动物模型是研究其耐药机制和探讨治疗方法的重要工具.马桑内酯(CL)是从植物马桑中提取的一种致痫物质,对动物反复肌内注射阈下剂量的马桑内酯可以建立化学点燃模型,并具有一定的耐药性.
SD大鼠,6~8周龄,雄性.大鼠每隔84h(3.5d)肌内注射马桑内酯1mk/kg ,点燃后改为每隔7d肌内注射维持量马桑内酯1mk/kg .
(1)行为学观察与皮层电图(ECG)检查,按Racine分级标准(见大鼠青霉素癫痫模型),在连续2次注射马桑内酯期间,大鼠出现10次以上3级或以上的发作,即达到复杂部分发作点燃标准.肌内注射马桑内酯约15min后,大鼠出现频繁的单侧前肢阵挛,每次持续数秒至10s .ECG为持续数秒的高幅癫痫波,波开多为棘波﹑尖波﹑棘—尖复合波,为3级发作.此状态反复发作10~20min .大鼠双侧前肢逐渐伸直,四肢分开,尾巴后伸,重心下移,强烈抽动,蜷缩,伸直频繁交替,持续10~20s后停止数秒钟,再次出现,为4~5级发作.ECG为连续的高幅癫痫波,波开为多棘波,复合波.在肌内注射马桑内酯约40~50min后.大鼠发作减少,ECG以慢波为主,1h后在大鼠完全恢复正常,ECG转为基础波.
(2)脑内P—糖蛋白(P—gp)及多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达水平的检测,点燃组大鼠海马,颞叶皮质等部位有P—gp和MRP1的大量表达,在上述区域,点燃组大鼠可见大量胞质染为的神经质细胞,血管内皮细胞和神经细胞.在未点燃组和对照组大鼠的脑组织内,仅有少量的血管内皮细胞呈阳性表达,罕见有胶质细胞或神经细胞呈阳性表达.
(3)模型成功率 55只大鼠,30次注射马桑内酯后,有23只大鼠达到点燃标准,未点燃28只,死亡4只,点燃率41.8%.
最新评论