大鼠灌胃是最常见的给药方法之一.灌胃所用的针头可以从市场上购买,操作方法和小鼠灌胃大同小异,只是由于大鼠体积较大,抓大鼠的手法和小鼠有所不同.
大鼠灌胃时,右手持灌胃注射器,左手拇指和食中二指相对,抓住大鼠颈部皮肤,使大鼠的头部和颈部及躯干呈一直线,不需要固定大鼠的尾巴,就可以实施灌胃操作了,其余的操作均和小鼠一样.
鼠一般灌胃量为1ml/100g体重,因此一般大鼠灌入2ml是可以的.大鼠的灌胃给药体积一般为5～10ml/kg.但是药物的浓度是需要自己按照动物实验方的方法进行换算：200g大鼠对应70kg人的折算系数为0.018.
2.腹腔注射时右手持注射器,左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴,另外三个手指抓住大鼠的颈部,使大鼠的头部向下.这样腹腔中的器官就会自然倒向,防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官.进针的动作要轻柔,防止刺伤腹部器官.
3.尤其是对于体重较小的大鼠,腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离,最好是从腹部一侧进针,穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔,注射完药物后,缓缓拔出针头,并轻微旋转针头,防止漏液.
这也是常见的操作,稍微有点难度,没有指导的话,一开始可能会感觉有点手足无措.但是可以肯定的说,只要掌握了方法,大鼠的尾静脉注射还是很容易的.总的来说,大小鼠的尾静脉注射难度相当,熟练后,大鼠应该比小鼠注射更容易,因为大鼠的尾巴较粗,而且血管也较粗,进针的手感比较好找.但是大鼠年龄增大后,尾部鳞片也较厚,此时尾静脉注射难度会加大,进针点宜选择两个鳞片的间隙,以利于针尖顺利刺入.
1. 首先要固定大鼠,最简单的固定方法就是把大鼠麻醉,然后大鼠躺在那里不动,就可以顺利操作了.但是我们往往需要多次给药,就是单次给药的话,每只都麻醉的话,也很麻烦,而且还要考虑麻醉对实验结果和动物的影响,因此,有必要找另外的方法固定了.
再有的固定方法就和小鼠类似,做一个圆筒,最好是金属做的,(可以在当地的铁匠铺,或者买白铁铺里面定做)首先是金属比较结实,而且可以用来固定在铁架台上,方便操作.圆筒的一段有个盖子可以拿下来,盖子中间有个小孔,可以让大鼠的尾巴伸出来(中间的小孔可以用胶布缠一下,防止锐利的边缘割伤大鼠尾巴).另外一段可以用金属网的结构,网的形状可以做成子弹头的头端形状.网状结构可以让光线透近来,方便大鼠钻进圆筒里面.圆筒的长度约15～20cm,直径约5～8cm,可以做个系列长度和直径的圆筒,适合不同大小的大鼠.操作的时候,可以把圆筒固定在铁架台,有的一面稍微向上,拔下另外一头的盖子,抓住大鼠的尾巴,悬空大鼠,让大鼠的头部靠近圆筒,稍微引导一下,大鼠就会钻进圆筒,将大鼠的尾巴穿过盖子中间的小孔,盖上盖子,向外拉直大鼠尾巴,就可以进行下一步操作了.
也有直接利用大鼠笼盖的固定大鼠,向小鼠固定的方法固定大鼠,那是高手所为,总共只需要一次到两次的静脉注射时可以试用,不推荐使用.
2.固定好大鼠后就是注射了,一般用一次性的5ml的注射器,去除针头,接上5.5号的头皮针,用头皮针穿刺,个人感觉比较方便,而且便于固定针头.
3.注射前首先要让大鼠的血管充盈.可以采用75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用温水浸泡的方法,(一般水浴温度45度左右),大概2分钟就可以让尾部左右二侧静脉充分扩张,用电吹风的热风吹大鼠尾部,这种使静脉扩张的方法不但快而且操作方便,但要控制好吹的方式,不要弄伤动物.若大鼠的血管很不清楚,推荐采用温水浸泡的方法,水温以不烫手为宜.温水浸泡2～3分钟后,取出大鼠尾巴,用干棉球擦拭.等一会儿,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以进针了.若血管还不充盈,可以反复用温水浸泡,切不可冒险注射,除非你手法很熟练,另当别论.
4.大鼠尾部共有四条血管,一般认为左右的两条静脉比较容易注射,多采用这两条静脉进针.一般要求进针部位靠近大鼠的尾端,这样若注射失败的话,还可以再向上选择进针点.但是进针部位也不可以太靠下,因为越往下,静脉越细,操作越难,一般以大鼠尾巴下三分之一的比较好.
5.最关键的就是进针了.进针时操作者左手食指和拇指固定住大鼠的尾巴,让大鼠的尾巴在经过拇指后向下弯曲,进针点靠近拇指指甲.针头和血管呈约 30°角,针尖斜面朝上,轻轻挑刺入皮肤后针头立即和血管平行,一般情况下一次就可以进入血管,可以将针头刺入血管一大半,轻轻回抽针栓,看见有明显的回血,就可以推注药液了,正常情况下,推注的过程应该没有明显阻力,血管也不会鼓起.推液时动作宜轻柔,若发现血管鼓起,那是针头没有刺入血管,需立即拔出针头,重新注射.(正常情况下,均可以看见回血,若没有回血,9成是没有进入血管,不要推药,拔出针头,重新穿刺,以防推注药液导致大鼠尾巴皮下水肿,加大穿刺的难度,若是带有颜色的液体,如伊文斯兰,就更要注意)
大鼠的舌静脉给药比较少见,因为他需要在麻醉状态下方可以操作.不麻醉的情况下也不是不可以,但是若不麻醉的话,既不符合动物福利,也很容易失败,而且操作人员也容易受伤.
2.大鼠麻醉后,仰卧位固定在鼠板上,牙齿也固定好.右手持眼科镊,轻轻拉出大鼠舌头,左手拇指和食指轻轻捏住舌尖,可见大鼠舌头两侧均有一条很清楚的静脉,一般右侧的比较顺手(我是右撇子),左手稍微绷紧大鼠舌头,不要绷的太紧,这样静脉会看的不清楚,以能拉直大鼠舌头,且能清楚看见血管为宜.
3.右手持注射器,针尖斜面朝上,和舌头血管呈15°角,挑刺入血管.(舌静脉非常浅,针尖挑刺舌面皮肤后就进入血管了),轻轻推注药液,若发现舌头有鼓起,则是注射失败.这样注射点很容易出很多学,形成血肿,这侧静脉想再次注射就很困难了,那么最好就选用另外一侧静脉了.
首先需要脱毛可以配制8%的硫化钠溶液,也可以自配脱毛剂,配方：硫化钠：肥皂粉：淀粉为3：1：7,加水混合成糊状软膏.用棉签将脱毛剂涂在要脱毛的部位,观察看见区域内鼠毛发粘用干净棉签沾洁净的水将脱毛部位清洗干净,大鼠一般用腹部皮肤,小鼠可用背部皮肤.
鞘内给药有两种方式：一是急性给药,二是长期慢性给药.慢性给药,具体的说应该是在出寰枕膜后将PE10管插入蛛网膜下隙,至有清亮脑脊液反流后可确定正确,然后将PE10管插入7.5cm达腰膨大水平,固定并缝合即可.注射反意寡核苷酸,所以直接在L4～5椎间隙进针就可以对于长期给药宜选慢性套管给药,选做好插入深度标记的PE-10导管,根据动物大小和所需埋置的脊髓节段,决定好插入深度,一般270～320g的大白鼠腰骶部约 7.5cm,胸段约5～5.5cm.给药：将4号注射针头锯断,并磨尖,插在PE-10导管上,导管另一端接在另一接又注射器的4号针头上,给药时只需将钢管另一端与动物身上埋植好的PE-10导管相接即可.
大鼠给药方法类似于小鼠,而且大鼠的生殖道比小鼠要长一些,会比小鼠操作相对容易一些.小鼠内感染,是往小鼠内注射感染菌液,开始感染时采用的是用小儿科的头皮针改做的软管向小鼠生殖道内注射,但因为小鼠生殖道很浅,而且软管本身占有小鼠生殖道的一部分体积,导致主入的菌液易漏,后来尝试用50ul的加样器每次取20ul,采取多次注射的办法.
雾化吸入需要有雾化设备,一般医院的都有,但是医院的如果借不出来,自己家里的加湿器也可以凑合.
雾化给药的时候,要把大鼠放在一个相对比较密闭的的容器中(当然要有透气孔),让大鼠尽可能多地接触药物,但是好象没有专门的这种容器,一般都是自制的,材料最好是有机玻璃.如果需要一只一只给药的话,那么大鼠固定器也可以着用.
从药物进入体内分布的部位来看,滴鼻应该作用于局部为主,而喷雾/雾化吸入等给药方式可使药物进入气管,肺等部位,吸收情况应该有比较大的不同.
动物先进行麻醉后,以左手食指和拇指抓住动物双耳部,翻转动物身体置于左手掌内,使其鼻尖朝向操作者;右手持注射器,将接种药物,逐滴滴入动物鼻内.接种量不宜过多：大鼠为0.05～0.1ml(小鼠为0.03～0.05ml;豚鼠与兔可为2ml).
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