流程：1)麻醉 2)开胸 3)心脏左心室穿针,剪开右心耳 4)生理盐水冲水 5)4%多基甲醛固定 6)取脑 7)保存或切片.
一般方法为：4%多聚甲醛PBS缓冲液配法：称取40g PFA溶于装有500ml DEPC水的玻璃容器(烧杯或烧瓶)中,持续加热磁力搅拌至60～65℃,使成乳白色悬液.用1.0mol/L的NaOH值至7.0,使呈清亮状(滴加),再加入约500ml PBS,充分混匀(在冰浴或冷水浴中),可再检测一下pH,过滤后定容至1000ml,室温或4℃保存备用.
我们用的方法：加热至60～65℃固然融解的快,不过容易挥发,气味难闻,不是好的选者.我们是这样做的,感觉不错,在此强烈推荐：先配好pbs,称好相应的多聚甲醛,37c水浴或温箱密封放置2天,就能全溶.
5 夹闭腹主动脉：只灌注上肢及头脑,固定的好又快,又省多聚甲醛.多聚甲醛用100ml以下即可.
7 灌注成功的标志：刚开始灌注时老鼠前肢剧烈抽动(下肢不抽动证明腹主动脉夹闭完全);前肢及颈部僵硬;所灌注的脑组织白而硬.
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