(1)分组 将动物随机分为正常组、假手术组和海人酸(KA)致痫组,每组再分为6h、24h、72h和7d、14d、21d时间点组别.
(2)脑电记录电极的埋植与KA杏仁核微量注射 在正常组、假手术组和海人酸致痫组中各随机选取2只,致痫后连续记录6h脑电变化.左侧顶叶皮层电极植入坐标为前囟后4.0mm,左外侧3.0mm,深度为颅骨表面下1.5mm,电极与脑电仪相连,海人酸致痫后连续记录6h脑电变化.模型组以右侧杏仁基底核为海人酸注射部位,坐标为前囟3.5mm ,旁开4.5mm , 颅骨表面下8.0mm .应用立体定位仪,按上述垂直插入电极.用高效黏合剂、牙托粉加502胶固定电极.麻醉后30min 用5μl微量注射器注入海人酸1μl(1μg).注射完毕后结扎皮肤切口,将大鼠置于50cm X 30 cm X 50cm敞口玻璃罩中便于行为学观察.术后腹腔注射青霉素8X10*U/(kg.d),共5d , 以预防感染.
(1)行为学观察 大鼠行为分级按Racine分级法(见大鼠青霉素癫痫模型).结果显示,大鼠在杏仁核注射海人酸后平均41.2min和61.2min分别依次出现部分性发作和癫痫大发作,均出现Racine lV级以上发作.表现为凝视、湿狗样颤动、点头等部分发作,前肢痉挛、后退、旋转、站立倾倒、四肢抽搐等大发作行为.
(2)点燃成功率 模型组动物95只,点燃成功率为90%.假手术组杏仁核注射PBS液后无肢体抽动及大发作现象.
(3)单极项叶皮层脑电图检查 正常大鼠脑电波形,频率以5~10Hz为主,波幅小于500μV.假手术组有3只出现散发的尖波.模型组海人酸注射后大鼠脑电均出现多种形式的癫痫性放电.典型波形有单棘波、多相棘波、棘慢波、尖波发作性节律及发作后等.
(4)脑组织病理学检查 光镜观察与对照组比较,模型组在海人酸注射早期主要表现为大鼠海马各区和颞叶神经元核周体皱缩,树突肿胀,胶质细胞水肿,以海马为颞叶也有相应改变.海人酸注射后7~21d可见海马各区和颞叶胶质细胞在受损神经元周围积聚形成卫星灶,并见神经元现象,以海马CA3区最为显著.
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